El cuadro, acompañado por el emperador Carlos V, fue ejecutado en Augsburgo en 1548. Isabella de Portugal (1503-1539) se casó con el emperador Carlos V en 1526. Murió muy joven, cuando tenía sólo 36 años, y mucho antes de que Charles V encargó a Titian pintar su retrato. Su rostro pálido enfatiza su dulzura, que también es visible en los dedos esbeltos de sus manos. Todo el retrato se centra en una magnífica armonía de color del rojo, blanco y oro. Un contraste de color encantador es proporcionado por las tintes azules y verdes del paisaje, y los ojos de la emperatriz.